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精子的检查方法及动态参数分析

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    2343例男科就诊患者精子动态参数分析

    目的 探讨精子动态参数在评价男性生育能力方面的应用价值。方法 严格按照技术规范,用计算机辅助精液分析(CASA)系统对本院2343例男科门诊就诊的患者精液进行常规指标和精子动态参数分析。结果 ①正常精液组和异常精液组各项精子动态参数比较,均存在统计学差异;②随着精子存活率的下降,曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、平均移动角度(MAD)、侧摆幅度(ALH)、前向性(STR)下降明显,鞭打频率(BCF)呈上升趋势,而直线性(LIN)、摆动性(WOB)差异无性;③与密度活力正常组比较:少精组除LIN、STR有所增加,MAD、BCF有所下降,差别有统计学意义外,其余五项参数差别无统计学意义;弱精组除MAD无统计学差异外,其余八项参数均有统计学差异;少弱精组除MAD和ALH无统计学差异外,其余七项参数均有统计学差异。结论 精子动态参数是评估精液质量的重要指标,为男性不育的诊断、治疗和研究提供了充分的依据。

        精液质量分析是评价男性生育能力的重要依据,也是临床男性不育症诊断和治疗的重要检测项目。影响男性不育的因素很多,但大部分与精子的数目、形态及运动功能改变有关[1]。以前评价男性生育力的实验室参数主要依据精液常规检查(包括精子存活率、精子活力、精子密度等),然而常规精液检查对精子运动的评估只是采用主观目测,无法测定精子的微细运动特点,在临床衡量男性生育力方面提供的信息有限,影响男性不育的诊断和治疗。计算机辅助精液分析(CASA)系统不仅能够有效地测定精液常规指标,还可分析多项精子动态参数[包括曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、平均移动角度(MAD)、侧摆幅度(ALH)、鞭打频率(BCF)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)、前向性(STR)等],为精子的微细运动提供了量化结果[2]。因此,本研究采用该系统对本院2343例男科门诊患者精液进行了常规指标和精子动态参数分析,现报告如下。

    1  材料与方法

    1.1  研究对象  选取2006年7月~2007年8月本院男科门诊就诊的患者2343例(排除无精子、死精子病例,因其动态参数为0),年龄18~52岁,平均年龄(29.5±4.4)岁。

    1.2  检测仪器  WLSY9000伟力精子彩色分析系统(北京伟力技贸公司提供)。

    1.3  检测方法  所有研究对象均严格按照《浙江临床检验操作规程》,在标本采集前禁欲3~7d(包括无遗精或手淫,具体标准是:25岁以下禁欲3d,25~35岁禁欲5d,35岁以上禁欲7d)。通过手淫法留取全部精液标本于洁净干燥的性采精杯中(取不者嘱其重取),精液取出后轻轻混匀,静置35~37℃的恒温水浴箱中,观察其液化情况。待精液液化(对1h未液化或液化不者也在1h内进行检查[3])后充分混匀,进行计算机辅助精液分析,严格按照仪器操作说明,取精液于37℃预热的精子质量检测系统计数板上,保温2min后开始检测。每份标本随机采样至少200个精子以上,对于严重少精子者,至少采集20个视野,获得精子存活率、精子活力、精子密度及精子动态参数等定量结果,每份标本均在3~5min内完成上述项目的检测。

    1.4  精液质量判定标准及分组  ①按《人类精液及精子宫颈黏液相互作用实验室检验手册》[3]规定的正常精液标准(即精子密度≥20×106/mL;精子存活率≥50%;精子活力:a级≥25%或a+b级≥50%,分为正常精液组(符合规定的正常精液标准)和异常精液组(有一项或以上不符合规定的正常精液标准)。②按不同精子存活率分为三组,其标准分别为精子存活率>80%;50%≤精子存活率≤80%;精子存活率<50%。③按不同精子密度和活力分为:精子密度活力正常组(即精子密度≥20×106/mL,a级精子≥25%或a+b级精子≥50%);少精组(即精子密度<20×106/mL,a级精子≥25%或a+b级精子≥50%);弱精组(精子密度≥20×106/mL,a+b级精子<50%且a级精子<25%);少弱精组(精子密度<20×106/mL,a+b级精子<50%且a级精子<25%)。

    1.5  数据处理  应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析。两组数据比较采用成组t检验,多组数据比较采用单因素方差分析和Dunnettt检验,P≤0.05为差异有统计学意义。

    2  结    果

    2.1  正常精液组和异常精液组精子动态参数比较  两组间各项参数比较均存在统计学差异(表1)。

    2.2  不同精子存活率精液间动态参数比较  随着精子存活率的下降,VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、STR下降明显;BCF呈上升趋势;而LIN、WOB差别无性(表2)。

    2.3  不同精子密度活力的精液间动态参数比较  四组精液间各项动态参数指标经方差分析显示各个总体均数不相等或不全相等,经Dunnettt检验后发现:①少精组与密度活力正常组比较LIN、STR有所增加,MAD、BCF有所下降,差别有统计学意义,其余五项参数比较差别无统计学意义;②弱精组与密度活力正常组比较,除MAD差别无统计学意义外,其余八项参数比较差异均有统计学意义;③少弱精组与密度活力正常组比较,除MAD和ALH无统计学差异外,其余七项参数比较差异均有统计学意义(表3)。表1  正常精液组和异常精液组的精子动态参数比较 表2  不同精子存活率精液间动态参数比较表3  不同精子密度和活力精液间动态参数比较

    3  讨    论

    正常的受孕过程需要精子特征性的微细运动以穿透卵丘和透明带,精子的、直线、前向运动是提高受孕几率的。传统的常规精液检查无法测定精子微细运动,在评价男性生育力方面存在一定的局限性,而精子的动态参数客观地反映了精子微细运动特点,并与受精率相关[4]。本研究通过CASA分析系统为精子的微细运动提供了量化结果,进一步为男性生育能力评价提供客观依据。

    动态参数VCL、VSL、VAP反映了精子的运动速度,与精子的活力密切相关[5];LIN、WOB、MAD、ALH和STR等参数反映了精子运动的直线性和前向性。精子运动直线性和运动速度的降低将会导致受孕的几率大大降低。本研究发现,精液质量异常组的VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、WOB、LIN和STR均明显低于正常组,说明该组患者的精子在运动方面存在缺陷,即精子运动的线性、速度、前向等特性都有异于正常精子。上述精子运动缺陷,可能正是导致男性生育能力低下的原因。

    在不同精子存活率精液间动态参数分析中,随着精子存活率的下降,VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、STR明显下降,提示向前运动的精子数目减少、精子运动能力有下降趋势;BCF呈上升趋势则说明原地打转的精子数目增加。这些指标充分反映了不同存活率精液中精子微细运动特性存在性差异,再论证了精子动态参数对于男性生育能力评价的重要性。

    在不同精子密度活力的精液间动态参数分析中,我们发现少精组的LIN、STR有所增加,MAD、BCF有所下降,可以看出密度少的精液在精子活力正常时精子的直线向前运动相对较快,可能是因为在一定的空间内,由于精子数目减少使精子在运动时所受的空间阻碍变小,从而使其运动加快。这提示精液常规检查密度低于正常者其妻仍有可能怀孕,我们在评价男性的生育能力时,应综合考虑。同时,弱精组LIN、STR和ALH,少弱精组STR、LIN均低于密度活力正常组,差别有统计学意义(P<0.05),少弱精组的ALH略低于密度活力正常组, 但差别无统计学意义(P>0.05),这提示两组精子运动的直线性有所降低。此外,弱精组和少弱精组的VSL、VCL、VAP三项精子动态指标均呈性降低,与密度活力正常组比较均有性差异(P<0.01),提示两组精子的运动速度比较缓慢,精子很难通过女性生殖道到达受精部位,从而可能导致不孕或不育。

    可见,将精子动态参数分析与精液常规指标检查相结合,可以更有效、更客观地了解精液质量的真实情况,正确评价男性生育能力,为男性不育的诊断、治疗和研究提供更充分的依据。但由于人类精液质量受各种因素的影响变化较大,在男性不育症患者检测诊断指南[6]中亦明确规定:“首次精液检查合格者,可以认为他们的精液质量是正常的,而首次检查不合格者,必须重复检查精液。”因此在评价个体生育能力时,仍应综合分析各种可能性后再作出判断。

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